Johdanto
On hyvin tunnettua, että normaali verisuonten endoteeli säilyttää verisuonten homeostaasia säätelemällä verisuonten sävyä, moduloimalla paikallista solukasvua ja solunulkoisen matriisin kerrostumista ja hallitsemalla homeostaattisia vasteita (Afsar et al., 2014, Hopkins, 2013, Weseler ja Bast, 2010). Endoteelin toimintahäiriö on laskettu ateroskleroosin patogeneesiin (Rajendran et al., 2013). Endoteelin toimintahäiriön keskeinen mekanismi on reaktiivisten happilajien (ROS) muodostumisen ja endoteelistä peräisin olevan typpioksidin tuotannon epätasapaino, mikä johtaa ROS:n liialliseen kertymiseen ja NO:n biologisen hyötyosuuden laskuun (Ichihara, 2013, Tinkel et al., 2012). ). Se liittyy endoteelin typpioksidaasisyntaasin (eNOS) irtoamiseen (Forstermann ja Sessa, 2012, Risbano ja Gladwin, 2013, Schramm et al., 2012). eNOS-irrotus on ilmiö, jolle on tunnusomaista elektroninsiirron siirtyminen eNOS-molekyylin sisälläl-arginiinin hapettuminen molekyylihapen pelkistämiseksi, jolloin muodostuu superoksidia NO:n sijasta (Kietadisorn et al., 2012, Li ja Förstermann, 2013). eNOS:n irrottaminen ei edistä ainoastaan NO:n biologisen hyötyosuuden vähenemistä, vaan myös lisää ROS:n muodostumista, jolla on tärkeä rooli ateroskleroosin patogeneesissä. Tetrahydrobiopteriini (BH4) on tärkeä kofaktori eNOS:n aktiivisuudelle. Solujen BH4:n väheneminen johtaa eNOSin irtoamiseen ja endoteelin toimintahäiriöön, kun taas BH4:n täydentämisen on osoitettu parantavan eNOS-kytkentää ja endoteelin toimintaa. Endogeeninen BH4 muodostuuuudelleensynteesipolku ja pelastusreitti (Kietadisorn et al., 2012, Li ja Förstermann, 2013). Guanosiinitrifosfaatti (GTP) syklohydrolaasi 1 (GCH 1) on nopeutta rajoittava entsyymi, joka katalysoi BH4:n muodostumista GTP:stä.uudelleenBH4:n muodostumisen synteesi. Pelastusreitti palauttaa BH4:n hapettuneesta muodosta 7,8-dihydrobiopteriinista (BH2) dihydrofolaattireduktaasin (DHFR) kautta. On raportoitu, että eNOS:n irrottaminen liittyy enemmän BH4/BH2:n vähentyneeseen suhteeseen, ja suhde on todennäköisesti perustavanlaatuinen molekyyliyhteys oksidatiivisen stressin ja endoteelin toimintahäiriön välillä (Crabtree et al., 2008).
Molekyyliepidemiologiset tutkimukset ovat osoittaneet vahvan käänteisen yhteyden soijapohjaisen ruokavalion kulutuksen ja ateroskleroosiriskin välillä (Liu et al., 2012, Wenzel et al., 2008). Genisteiini (4′,5,7-trihydroksi-isoflavoni) on tärkein isoflavoni soijassa ja puna-apilassa. Se on herättänyt laajaa huomiota erilaisten ateroskleroosiin kohdistuvien biologisten vaikutustensa vuoksi (Albuquerque et al., 2015, Boesten et al., 2015, Jia et al., 2013, Kim et al., 2010, Li et al., 2010, Yang et ai., 2010). Genisteiinin merkitys johtuu tunnetusta tosiasiasta, että genisteiini voi lisätä eNOS-aktiivisuutta, lisätä NO-tuotantoa ja sillä on verisuonten endoteelin toimintaa suojaava vaikutus. (Kuriyama ym., 2014, Si ja Liu, 2008, Si et ai., 2012, Sun et ai., 2015). Mekanismeja ei kuitenkaan ole selvitetty.
On kertynyt todisteita, jotka viittaavat siihen, että sirtuiini-1 tunnustetaan endoteelin suojana ateroskleroosin kehittymiseltä (Stein and Matter, 2011). Sirtuiini-1 on tärkeä signalointimolekyyli endoteelissä. Sirtuiini-1 sitoutuu suoraan eNOS:iin ja sen on osoitettu kohdistavan eNOS:iin deasetylaatiossa, mikä stimuloi NO:n tuotantoa ja edistää verisuonten rentoutumista. Sirtuiini-1:n alasäätely liittyy tiukasti endoteelin toimintahäiriöön. On raportoitu, että sirtuiini-1:n ilmentyminen on vähentynyt ihmisen ateroskleroottisissa plakeissa (Gorenne et al., 2013). Lisäksi se on raportoinut H2O2hoito vähentää sirtuiini-1-proteiinin ilmentymistä endoteelisoluissa (Arunachalam et al., 2010). Resveratrolin suojaavaan vaikutukseen endoteelin toimintaan liittyy stimuloiva sirtuiini-1 (Meng et al., 2014). Ratkaisevaa näyttöä sirtuiini-1:n roolista eNOS-irrotuksessa ei kuitenkaan ole.
Koska primäärisoluissa indusoitu sairausmalli on kliinisempi ja fysiologisesti merkityksellisempi ihmisen taudin kannalta, ihmisen primaariset napalaskimon endoteelisolut (HUVEC) ovat ihanteellisia käytettäväksi endoteeliin liittyvien sairauksien tutkimisessa. Tästä syystä tutkimuksen tarkoituksena oli arvioida genisteiinin potentiaalia eNOS:n irrottautumiseen ja sirtuiini-1:n roolia kehityksessä käyttämällä mallia hapettuneen matalatiheyksisen lipoproteiinin (ox-LDL) aiheuttamasta vauriosta HUVEC:issä.
Osion katkelmia
Materiaalit
Naudan sikiön seerumi (FBS), vastasyntyneen vasikan seerumi ja endoteelisolujen kasvulisä toimitti Gibco (Kalifornia, U.S.A.). Ox-LDL ostettiin Peking Union-Biololgy Co. Ltd:ltä (Peking, Kiina). Genistein hankittiin Sigma-Aldrichilta. Anti-NADPH oksidaasi 4 -vasta-aine (ab79971), anti-GTP-syklohydrolaasi 1 -vasta-aine (ab61858), anti-dihydrofolaattireduktaasivasta-aine (ab124814) ja anti-sirtuiini-1-vasta-aine (ab32441) toimitettiin Abcamilta. Kaikki muut reagenssit hankittiin Sigmalta paitsi as
Genisteiinin vaikutus NADPH-oksidaasista riippuvaiseen superoksidituotantoon ja NOX4:n ilmentymiseen
Kuva 1 osoitti, että ox-LDL (50 mg/l) tehosti superoksidin tuotantoa verrattuna kontrolliin (s<0,05); esikäsittely genisteiinillä estäisi merkittävästi superoksidin tuotantoa verrattuna pelkkään ox-LDL-hoitoon (s<0,05); lisäksi esikäsittely genisteiinillä (1000 nM) voisi vähentää superoksidin tuotantoa merkittävästi tasolle, jota ei voitu enää alentaal-NIMI. Siksi genisteiinin optimaalinen esikäsittelykonsentraatio oli 1000 nM seuraavissa kokeissa.
Kuva 2
Keskustelu
Vaikka on olemassa ristiriitaisia raportteja, todisteiden valtaosa viittaa siihen, että genisteiinillä on positiivinen vaikutus ateroskleroosiin ja verisuonten endoteelin toimintaan (Andrade et al., 2012, Babu et al., 2012, Borgwardt et al., 2008, González et al., 2011, Fayed, 2014, Lin ym., 2011, Little ym., 2012, Si et ai., 2012, Xiang et ai., 2010, Zhang ym., 2013). Genisteiini fysiologisena pitoisuutena (10–100 nM) vaikuttaa endoteelisoluihin (Bhakta et al., 2006, Sandoval et al., 2010). Perustuu
Eturistiriita
Kirjoittajat vakuuttavat, että eturistiriitoja ei ole.
Lainannut (14)
Sirtuiinien perheenjäsenten ja solujen vanhenemisen tutkimus edistyy
2020, European Journal of Medicinal Chemistry
Lainausote:
FANG et ai. [39] havaitsivat, että astaksantiini voisi vähentää tulehduksellisten sytokiinien, kuten interleukiini-IL-β, IL-6, tuumorinekroositekijän TNF-ɑ, ja tulehdusta ehkäisevien vaikutusten tasoa. Dawasta ja puna-apilasta peräisin oleva genisteiini (4, 5, 7-trihydroksi-isoflavoni) on yleisesti käytetty antioksidantti ja anti-inflammatorinen lääke [40–43]. SIRT1/LKB1/AMPK-signalointireitillä on tärkeä rooli ikääntymisessä [44,45].
Ihmisen ikääntyminen on ilmiö, jossa solut, kudokset, elimet ja muut toiminnot heikkenevät ja heikkenevät asteittain ulkoisen ympäristön ja sisäisten tekijöiden vaikutuksesta. Se liittyy pääasiassa genomiseen epävakauteen, telomeerien kulumiseen, mitokondrioiden toimintahäiriöön, proteiinitasapainohäiriöön, antioksidanttivaurioon, mikroRNA-ilmentymishäiriöön ja niin edelleen. Sirtuiiniproteiini on eräänlainen deasetylaasi, joka voi säädellä solujen aineenvaihduntaa ja osallistua erilaisiin solun fysiologisiin toimintoihin. On havaittu, että sirtuiinien perhe voi pidentää hiivan elinikää. Sirtuiinit voivat estää ihmisen ikääntymistä monien signalointireittien kautta, mukaan lukien apoptoosin signalointireitti, mTOR-signalointireitti, sirtuiinien signalointireitti, AMPK-signalointireitti, fosfatidyyli-inositoli 3 -kinaasi (PI3K) -signalointireitti ja niin edelleen. Tämän perusteella tässä artikkelissa tarkastellaan sirtuiiniperheen Sirt1, Sirt3 ja Sirt6 anti-aging-tähtijäsenten toimintaperiaatetta ikääntymisen estämiseen liittyvissä signalointireiteissä ja tyypillisissä yhdisteissä, jotta saataisiin ideoita sirtuiinien ikääntymistä estävien yhdisteiden seulomiseen. perheenjäsenet.
Metabolinen oireyhtymä: Ruokavalion flavonoidien ehkäisevät vaikutukset
2018, luonnontuotekemian opintoja
Lainausote:
Isoflavoneja on runsaasti soijapavuissa [100]. Genisteiini on isoflavoni, jonka tiedetään vähentävän hapettuneiden matalatiheyksisten lipoproteiinien (oxLDL) aiheuttamaa superoksidin tuotantoa ja NOX4:n ilmentymistä ja lisäävän BH4/BH2-suhdetta ihmisen endoteelisoluissa [101]. Genisteiinin on myös osoitettu parantavan sirtuiini-1:n eNOS-irrottamista ja kohonnutta ilmentymistä.
Useat tutkimukset ovat osoittaneet, että ravinnon flavonoidien nauttiminen liittyy metabolisen oireyhtymän riskin vähenemiseen. Monen tyyppisiä flavonoideja löytyy yleisesti hedelmistä, vihanneksista ja juomista eri tasoilla. Monet tutkimukset ovat osoittaneet flavonoidien antioksidanttiset vaikutukset, ja tällaiset vaikutukset todennäköisesti edistävät flavonoideihin liittyviä terveyshyötyjä. Kemiallisen perusrakenteensa perusteella flavonoidit luokitellaan alaluokkiin, jotka sisältävät flavanonit, isoflavonit, flavonit, flavonolit, flavan-3-olit (flavanolit) ja antosyaanit. Eri flavonoidialaluokkiin liittyvät erilaiset vaikutukset johtuvat kemiallisen rakenteen eroista, ja ne sisältävät molekyylimekanismeja, jotka liittyvät insuliiniresistenssiin, liikalihavuuteen, hypertriglyseridemiaan, hyperkolesterolemiaan ja verenpaineeseen. Metabolinen oireyhtymä käsittää joukon sairauksia, mukaan lukien verenpainetauti, hyperglykemia, dyslipidemia ja liikalihavuus, ja se liittyy lisääntyneeseen ateroskleroottisen sydän- ja verisuonitaudin riskiin. Vaikka flavonoidien terveyshyödyt tunnetaan laajalti, flavonoidien ehkäiseviä vaikutuksia metabolisen oireyhtymän patogeneesiin ei ole vielä selvitetty. Siksi flavonoidien käyttö verisuoniriskien (esim. endoteelin toimintahäiriön) ehkäisyyn edellyttää yksityiskohtaista ymmärrystä niiden vaikutuksista verisuonten sävyyn, verisuonitulehdukseen, oksidatiiviseen stressiin ja insuliiniresistenssiin. Tämän luvun tavoitteena on arvioida ruokavalion flavonoidien saannin ja metabolisen oireyhtymän riskin välistä yhteyttä. Tätä varten teemme kirjallisuuskatsauksen ja teemme yhteenvedon eri flavonoidialaluokkien vaikutuksista ja niiden vastaavista vaikutusmekanismeista perustuen useisiin ihmisillä tehtyihin epidemiologisiin tutkimuksiin sekä metabolisen oireyhtymän in vitro- ja in vivo -malleihin. Keskustellaan vaikutusten taustalla olevista mekanismeista, mukaan lukien geenien ja proteiinien ilmentymisen säätely ja antioksidanttiset vaikutukset.
MiR-34a/sirtuin-1/foxo3a osallistuu genisteiiniin, joka suojaa ox-LDL:n aiheuttamilta oksidatiivisilta vaurioilta HUVEC:issä
2017, Toxicology Letters
Lainausote:
MDA-tason nousu voi olla indikaattori ROS:n lisääntyneestä muodostumisesta. Genisteiini, luonnollinen fytokemiallinen antioksidantti ja vapaiden radikaalien sieppaaja, on saanut huomattavaa huomiota oksidatiivisia vaurioita vastaan (Chu et al., 2016; Xi et al., 2012; Zhang et al., 2016). Tässä tutkimuksessa genisteiinilisäys lisäsi merkittävästi SOD:n, CAT:n, GSH:n ja GPx:n aktiivisuutta.
Genisteiinin antioksidanttiaktiivisuus liittyy ateroskleroosin ehkäisyyn; taustalla olevia mekanismeja ei kuitenkaan täysin ymmärretä. Tässä tutkimuksessa ihmisen napalaskimon endoteelisoluja (HUVEC:t) esikäsiteltiin genisteiinillä eri pitoisuuksilla (10 nM, 100 nM ja 1 000 nM) 6 tunnin ajan ja sitten altistettiin ox-LDL:lle (50 mg/l) vielä 24 tunnin ajan.
Tulokset osoittivat, että genisteiini hillitsi reaktiivisten happilajien (ROS) ja malondialdehydin (MDA) tuotantoa ja paransi inhiboivaa vaikutusta superoksididismutaasin (SOD), katalaasin (CAT), glutationin (GSH) ja glutationiperoksidaasin (GPx) aktiivisuuteen, jonka ox- LDL-stimulaatio. Genisteiinin vaikutukset korreloivat sirtuiini-1:n lisääntymisen kanssa estämällä miR-34a:ta, ja ne poistettiin sirtuiini-1:n siRNA:lla tai miR-34a:n jäljittelemällä. Lisäksi genisteiinin hapettumisenesto liittyi miR-34a/sirtuiini-1-välitteiseen ydintranslokaatioon ja foxo3a:n deasetylaatioon, mikä liittyi MnSOD:n ja CAT:n parantuneiden ilmentymien kanssa. Tämä tutkimus viittaa siihen, että miR-34a/sirtuin-1/foxo3a saattaa olla tärkeä rooli genisteiinin käänteessä ox-LDL:n aiheuttamia oksidatiivisia vaurioita HUVEC:issä.
Genisteiini estää ox-LDL:n aiheuttamaa oksidatiivista stressiä ja vanhenemista HUVEC:issa SIRT1-p66shc-Foxo3a-reittien kautta
2022, Journal of Biochemical and Molecular Toxicology
Polyfenolivoiman hyödyntäminen kohdistamalla eNOS verisuonisairauksiin
2021, Critical Reviews in Food Science and Nutrition
Suositellut artikkelit (6)
Tutkimusartikkeli
Hopeananohiukkasilla käsiteltyjen makean veden simpukoiden alkuaineprofiilit: Metallominen lähestymistapa
Vertaileva biokemia ja fysiologia, osa C: Toxicology & Pharmacology, osa 188, 2016, s. 17–23
Ympäristöön vapautuvat nanohiukkaset voivat aiheuttaa riskin niissä oleville organismeille, jotka ruokkivat vesiekosysteemien suspendoituneita hiukkasia. Tämän tutkimuksen tarkoituksena oli tutkia erikokoisten hopean nanopartikkelien (nanoAg) vaikutuksia makean veden simpukoissa käyttämällä monielementtiä (metallista) nanopartikkelien ja ionisen Ag:n tunnusvaikutusten määrittämiseksi. Sinisimpukat altistettiin kolmelle pitoisuudelle (0,8, 4 ja 20 μg/l) 20 nm ja 80 nm nanoAg ja AgNO348 tuntia 15 °C:ssa. Altistusjakson jälkeen simpukat sijoitettiin puhtaaseen, ilmastettuun veteen puhdistusvaihetta varten ja analysoitiin seuraavat kokonaiselementit kidusten, ruoansulatusrauhasten ja sukurauhasten kudoksissa: Al, Ag, As, Ba, Be, Ca, Cd, Co, Cr , Cu, Fe, K, Mg, Mn, Mo, Pb, Na, Ni, Se, Sr, Th, U, V ja Zn. Metallotioneiinit (MT; vain ruoansulatusrauhanen) ja lipidiperoksidaatio (LPO) määritettiin myös kiduksista, ruuansulatusrauhasista ja sukurauhasista. Halkaisijaltaan 20 nm:n nanoAg havaittiin kaikissa kolmessa kudoksessa pitoisuudella 20 µg/l, kun taas 80 nm:n nanoAg havaittiin voimakkaammin ruoansulatusrauhasessa. Ionic Ag:tä löydettiin kiduksista korkeammalla tasolla kuin muissa kudoksissa. Korrelaatioanalyysi paljasti, että sukurauhasten Ag-tasot korreloivat merkittävästi Al:n kanssa (r=0,28), V (r=0,28), Cr (r=0,31), Co (r=0,32), Se (r=0,34) ja MT-tasot (r=0,28). Itse asiassa MT-tasot ruoansulatusrauhasessa nousivat merkittävästi 20 nm nanoAg:lla (20 μg/l) ja 80 nm:n nanoAg:lla (4 μg/l) ja AgNO:lla.3(<0,8 μg/l). LPO:ta havaittiin kiduksissa, ruoansulatusrauhasissa ja jopa sukurauhasissa kaikissa Ag-muodoissa. Erotteleva funktioanalyysi paljasti, että kaikki Ag:n muodot erosivat toisistaan ja valottamattomista simpukoista, joissa ioninen Ag oli läheisempi sukua 80 nm:n nanoAg:lle. Faktorianalyysi paljasti, että Ba:n, Ca:n, Co:n, Mn:n, Sr:n, U:n ja Zn:n tekijäpainot olivat jatkuvasti korkeat kaikissa kudoksissa; se selitti 80 % kokonaisvarianssista. Lisäksi seuraavat elementit osoittivat vahvaa korrelaatiota (r>0,7) toistensa kanssa: Sr, Ba, Zn, Ca, Mg Cr, Mn ja U. Näiden alkuaineiden vertailu muihin alkuaineisiin, joilla oli alhainen tai ei lainkaan korrelaatioita (esim. siirtymäelementit), paljasti, että näillä alkuaineilla oli huomattavasti pienempi standardipelkistyspotentiaali ja elektronegatiivisuus, mikä viittaa siihen, että vahvempiin pelkistäviin alkuaineisiin vaikuttivat eniten nanoAg:n ja ionisen Ag:n hapettavat vaikutukset kudoksissa. Itse asiassa kudoksissa, joissa oli oksidatiivista stressiä (LPO), oli alentunut useimpien näiden pelkistysaineiden taso. Päättelemme, että altistuminen Ag-nanohiukkasille aiheuttaa tyypillisen muutoksen makean veden simpukoiden kidusten, ruoansulatusrauhasten ja sukurauhasten kudosten alkuainekoostumuksessa. Sekä nanoAg että ioninen Ag vaikuttivat enemmän elementteihin, jotka reagoivat eniten oksidatiiviseen stressiin. Ag vähensi helposti Sr:ää ja Ba:ta, ja ne näyttivät reagoivan herkemmin nanoAg:lle kuin ioniselle Ag:lle. Metallominen lähestymistapa voisi auttaa ymmärtämään nanohiukkasten perustoimintatapaa simpukoissa.
Tutkimusartikkeli
Syvän selkärangan infektio akupunktion jälkeen selkärangan instrumenttien asetuksissa
Spine Deformity, osa 4, numero 2, 2016, s. 156-161
Akupunktiota voidaan käyttää kroonisen kivun hoitoon. Yleisimpiä akupunktioon liittyviä komplikaatioita ovat kipu, mustelmat, verenvuoto tai oireiden paheneminen. Harvoin esiintyy vakavampia haittavaikutuksia, mukaan lukien infektio, ilmarinta, septinen niveltulehdus ja ääreishermovaurio. Tietojemme mukaan ei ole raportoitu akupunktioon liittyvistä komplikaatioista selkärangan instrumentoinnin jälkeen.
Raportoida syvän infektion tapauksesta, joka on harvinainen akupunktion komplikaatio posteriorisen selkärangan fuusioitumisen jälkeen nuorten idiopaattisen skolioosin vuoksi.
Tapausraportti.
Tapausraportti.
15-vuotias nainen sairastui 21 kuukautta selkärangan artrodeesin jälkeen idiopaattisen skolioosin vuoksi, johon liittyy syvä selkärangan tulehdus. Potilas oli äskettäin saanut muunnelmaa akupunktiota (kuivaneulaushoitoa) mediaalisella periskapulaarialueellaan kroonisen selkä- ja hartiakivun hoitoon. Hänelle tehtiin sarjahuuhtelu ja -puhdistus implantin poiston yhteydessä. Intraoperatiiviset viljelmät paljastivat pseudomonas- ja aerobisia difteroideja. Kaksi viikkoa myöhemmin potilaalle kehittyi perikapulaarinen paise, joka vaati ylimääräistä leikkaushoitoa; tästä paiseesta saadut viljelmät olivat negatiivisia. 8 viikon antibioottikuurin jälkeen potilaalla ei ole infektioita normalisoitujen tulehdusmerkkiaineiden kanssa 2 vuotta leikkauksen jälkeen.
Akupunktiota harjoitetaan joskus osana selkäkipujen multimodaalista kivunhallintaohjelmaa, mutta se ei ole riskitöntä ja voi johtaa infektioon. Akupunktiosta johtuva syvä infektio voi saastuttaa olemassa olevat selkärangan instrumentit ja vaatia operatiivista puhdistusta, implanttien poistoa ja pitkäaikaista antibioottihoitoa. Näin ollen epämuodostuman etenemisen riski on lisääntynyt tässä skenaariossa, joka liittyy implantin poistoon.
Tutkimusartikkeli
Ulkopuolinen haittatapahtuma verensiirrossa: tulehdus
La Presse Médicale, osa 45, numerot 7–8, osa 2, 2016, s. e325-e329
Punaisten verisolujen (RBC) riittävien varastojen ylläpitämiseksi verensiirtoa varten RBC-yksiköitä säilytetään jääkaapissa vaihtelevan ajan ennen verensiirtoa. Osa punasoluista vaurioituu pitkäaikaisen varastoinnin aikana. Näiden vaurioituneiden punasolujen puhdistumisen oletetaan aiheuttavan tulehdusreaktion verensiirron vastaanottajassa. On kuitenkin kiistaa siitä, liittyvätkö punasolujen siirrot itse asiassa tulehdukseen, ja yleisemmin siitä, ovatko nykyiset standardit maksimaalisille punasolujen varastointiajoille turvallisia. Tutkimme todisteita tämän verensiirron ulkopuolisen haittatapahtuman puolesta ja sitä vastaan: aiheuttavatko tietyt punasolujen siirrot tulehdusta vai eivät.
Tutkimusartikkeli
Yksinkertainen ja kestävä korkean suorituskyvyn nestekromatografia yhdistettynä diodirividetektorimenetelmään genisteiinin analysoimiseksi hiiren kudoksissa
Journal of Chromatography B, osa 935, 2013, s. 47–53
Erilaisissa hiiren biologisissa matriiseissa kehitettiin yksinkertainen neste-neste-uuttomenetelmä ja kvantifiointi korkean suorituskyvyn nestekromatografialla (HPLC) yhdistettynä genisteiinin (GEN) diodirividetektoriin (DAD). 7-etoksikumariinia käytettiin sisäisenä standardina (IS) ja piikit erotettiin optimaalisesti käyttämällä Kinetex C18 -kolonnia (2,6 μm, 150 mm × 2,10 mm I.D.) 40 °C:ssa liikkuvan faasin isokraattisella eluutiolla 0,01 M natriumdivetyfosfaatilla vedessä. pH:ssa 2,5 ja metanolissa (55:45, tilavuus/tilavuus) virtausnopeudella 0,25 ml/min. Injektiotilavuus oli 10 µl. Kaikissa tapauksissa GEN-talteenottoalue oli yli 61 %. Kvantifioinnin alaraja (LLOQ) oli 25 ng/ml. Kalibrointikäyrien lineaarisuus oli tyydyttävä kaikissa tapauksissa, kuten korrelaatiokertoimet >0,996 osoittavat. Päivän ja päivän väliset tarkkuudet olivat <15 % ja tarkkuus vaihteli kaikissa tapauksissa välillä 90,14 % ja 106,05 %. Tätä menetelmää sovellettiin menestyksekkäästi GEN:n kvantifiointiin maksassa, pernassa, munuaisissa ja plasmassa yhden annoksen (30 mg/kg) laskimonsisäisen annon jälkeen naaraspuolisille BALB/C-hiirille.
Tutkimusartikkeli
Mailuoning-injektion vaikutus 8-isoprostaglandiini F2-alfaan ja superoksididismutaasiin kaneissa, joilla on raajan iskemia-reperfuusiovaurio
Journal of Surgical Research, osa 192, numero 2, 2014, s. 464–470
Toistaiseksi ei ole olemassa tehokkaita hoitoja raajan iskemia-reperfuusio (IR) -vauriolle. Tämän tutkimuksen tavoitteena oli tutkia Mailuoningin suojaavaa vaikutusta IR-vaurioon tutkimalla 8-isoprostaglandiini F2-alfan (8-iso-PGF) pitoisuuksia plasmassa.2a) ja superoksididismutaasin (SOD) aktiivisuus kaneissa.
Takarajan IR-vaurion kokeelliset mallit luotiin 30 kaniinilla, jotka jaettiin kolmeen ryhmään: vale-, IR- ja IR+Mailuoning-ryhmät. Iskemian lopussa Mailuoning injektoitiin suonensisäisesti kaneihin IR+Mailuoning-ryhmässä ja normaalia suolaliuosta annettiin kaniineille vale- ja IR-ryhmissä. Laskimoverinäytteet kerättiin 8-iso-PGF-tasojen mittaamiseksi2aja SOD:n aktiivisuus plasmassa seuraavina ajankohtina: iskemian alkaessa, iskemian lopussa ja 2, 4, 8, 12 ja 24 tuntia reperfuusion jälkeen. Luurankolihakset kerättiin ultrarakenteen tutkimiseksi.
8-iso-PGF:n tasot2alisääntyi merkittävästi ja SOD-aktiivisuus laski IR-ryhmässä joka ajankohtana reperfuusion jälkeen (P<0,01 taiP<0,05). Sitä vastoin 8-iso-PGF:n tasot2aja SOD-aktiivisuus eivät eronneet merkittävästi reperfuusion jälkeen IR+Mailuoning-ryhmässä (P>0,05), mutta ne olivat merkittävästi erilaisia verrattuna IR-ryhmään (P<0,01). Elektronimikroskopiaa käyttämällä luurankolihasvaurion osoitettiin olevan lievempi IR:ssä+Mailuoning-ryhmä reperfuusion jälkeen verrattuna IR-ryhmään.
Mailuoning pystyy vähentämään 8-iso-PGF:n liiallista tuotantoa2aja SOD-aktiivisuuden suojaaminen, jolloin sillä on suojaava vaikutus raajan IR-vaurioon.
Tutkimusartikkeli
Caveolin-1:n heikentynyt ilmentyminen edistää maksan iskemiaa ja reperfuusiovauriota
Biochemical and Biophysical Research Communications, osa 450, numero 4, 2014, s. 1351-1357
Caveolae ovat kalvorakenteita, joissa on runsaasti glykosfingolipidejä ja kolesterolia, ja caveoliini-1:n (Cav-1) on havaittu olevan keskeinen iskeemisen sietokyvyn kannalta. Sfingosiini-1-fosfaatti (S1P), yksi sfingolipidimetaboliiteista, tunnetaan hyvin antiapoptoottisista ominaisuuksistaan, joka ehkäisee iskemiaa ja reperfuusiovaurioita (IR). Täällä tutkimme Cav-1:n sytoprotektiivista mekanismia IR-vauriota vastaan. Urospuoliset C57BL/6-hiiret kärsivät 70 % maksaiskemiasta 60 minuutin ajan, mitä seurasi reperfuusio. Hiiret esikäsiteltiin metyyli-beeta-syklodekstriinillä (MβCD, 10, 25 ja 50 mg/kg, i.p.), caveolae-hajottajalla tai suolaliuoksella 48 ja 24 tuntia ennen iskemiaa. Seerumi- ja maksakudokset kerättiin iskemian lopussa, 0, 1, 4 ja 24 tunnin reperfuusion kohdalla. IR:n aikana havaittiin Cav-1-proteiinin ilmentymisen ja maksan ultrarakenteen caveoleiden lukumäärän vähenemistä, joita lisättiin esikäsittelyllä MβCD:llä. MβCD lisäsi myös IR-indusoituja nousuja seerumin alaniiniaminotransferaasi- ja tuumorinekroositekijä-a-tasoissa. IR alensi sfingosiinikinaasi 2:n (SK2) ja S1P-reseptori 2:n (S1P) tasoja2) mRNA-ilmentymiä, kun taas MβCD lisäsi myös näitä laskuja. Lisäksi IR johti mitokondrioiden sytokromin lisääntymiseencvapautuminen, kaspaasi 3, 8 -aktiivisuudet ja Bax/Bcl-xL-suhde, ja MβCD lisäsivät kaikkia näitä apoptoottisia parametreja. MβCD lisäsi myös p38 MAPK:n ja JNK:n fosforylaatiota, mutta ei vaikuttanut ERK:hen ja PI3K/Aktiin. Löytömme osoittavat, että Cav-1:n vaimeneminen välittää IR-indusoitua maksavauriota estämällä SK2/S1P:tä2signaloimalla ja tehostamalla apoptoottista reittiä.
Copyright © 2016 Elsevier B.V. Kaikki oikeudet pidätetään.